우리는 또한 PCR 실험을하고 있는데, 왜 결과가 항상 다른 것보다 훨씬 나쁠까요?

우리는 또한 PCR 실험을하고 있는데, 왜 결과가 항상 다른 것보다 훨씬 나쁠까요?

실험실에서 다른 사람의 PCR을 보면 증폭 효율이 높고 전기 영동 스트립이 완벽하고 자기 자신을 보면 오랜 시간 동안하기 힘들고 반응이 매우 좋다고 느낍니다. 위양성 테스트 결과 …… 문제?

많은 파트너들도 다양한 문제에 직면했다고 생각합니다. PCR 실험에서 벽에 부딪히면 반응 시스템 내의 요인을 무의식적으로 분석하지만 실험에서 소모품의 중요한 영향을 무시하는 경우가 많습니다.

PCR 결과가 잘못되었습니다. PCR 소모품이 필수적인 이유 일 수 있습니다. 한편으로, 소모품의 미세 오염 또는 억제제의 도입은 실험적 오염을 유발합니다. 반면에 소모품을 잘못 선택하면 실험 결과가 나빠질 수 있습니다.

문제가 다시 발생합니다. PCR 소모품에는 여러 유형이 있는데, 실험을보다 원활하게하기 위해 올바른 것을 선택하는 방법은 무엇입니까? 주의해야 할 문제는 무엇입니까? 걱정마 오늘I 다년간의 경험과 결합하여 PCR 소모품 선택 일반적인 문제를 분류하여 도움을 드리고자합니다.

 

Q1 : PCR 소모품이 보통 PP 재질로 만들어지는 이유는 무엇입니까?

Huida : PCR 소모품은 일반적으로 시약 또는 샘플과 직접 접촉하기 때문에 폴리 프로필렌 (PP) 물질은 생물학적으로 불활성이고 생체 분자에 부착되지 않으며 화학적 내성과 온도 내성이 우수합니다 (121에서 오토 클레 핑 가능) ° C, 열주기 동안 온도 변화를 견딜 수 있음).

 

Q2 : 다양한 크기의 PCR 튜브 / 플레이트 중에서 어떻게 선택해야합니까?

HUIDA : 선택 목적 : 특정 실험 요구 사항에 따라 올바른 제품을 선택합니다. 대부분의 PCR 튜브 크기는 PCR 반응의 요구 사항을 충족 할 수 있습니다. 이를 바탕으로 저용량 튜브를 먼저 선택하는 것이 좋습니다. 저용량 반응 튜브 / 플레이트는 머리 위 공간이 작기 때문에 열전도율이 향상되고 증발이 감소합니다. 동시에 너무 많거나 적은 샘플을 추가하지 않도록해야합니다. 너무 많으면 열전도율, 유출 및 교차 오염이 감소 할 수 있으며 너무 적 으면 샘플 증발 손실이 발생할 수 있습니다.

일반적인 반응 튜브의 사양 및 부피 :

단일 / 결합 튜브 : 0.5ml, 0.2ml, 0.15ml

96 웰 플레이트 : 0.2ml, 0.15ml

384 웰 플레이트 : 0.04ml

 

Q3 : 샘플 수량이 적을 때 단일 파이프 또는 복합 파이프를 선택하지만 일부는 평평한 덮개가 있고 일부는 볼록한 덮개가있는 이유는 무엇입니까?

Huida : 샘플 수량이 적을 경우 단일 튜브 또는 결합 튜브가 선호됩니다. 그러나 반응 부피가 크면 단일 튜브가 우세하고 부피가 0.5 mL에 도달 할 수 있습니다. 플랫 커버와 볼록 커버는 각각 장점이 있으며, 구체적으로는 다음 정보를 참조 할 수 있습니다.

단일 튜브 : 0.2ml 및 0.5ml; 샘플 수량을 유연하게 선택할 수 있습니다.

연결 튜브 : 0.2ml 또는 0.15ml는 선택 사항입니다. 8 개 또는 12 개의 튜브가 일반적입니다.

플랫 커버 : qPCR에 정확한 형광 신호 전송을 제공 할 수 있습니다. 마크를 쓰기 쉽습니다.

볼록한 덮개 : PCR 기기의 뜨거운 덮개와 접촉하여 압력으로 인한 반응 튜브의 변형을 줄입니다. 그러나 형광 신호 전송에 영향을 미치며 qPCR 실험에 적용 할 수 없습니다.

 

Q4 : 일부 PCR 플레이트에는 스커트가 있고 일부는없는 이유는 무엇입니까?

Huida : 실제로 PCR 플레이트의 스커트는 자동화 애플리케이션에 더 잘 적응하도록 설계되어 기기에 안정적인 지원과 기계적 내구성을 제공 할뿐만 아니라 파이 펫팅 프로세스 동안 더 높은 안정성을 제공합니다.

PCR plate는 일반적으로 non-hemline, half-hemline 및 full-hemline으로 구분됩니다.

없이 플레이트 : 대부분의 PCR 기계 또는 qPCR 기계에 적합하지만 자동화 애플리케이션에는 적합하지 않습니다. 파이 펫팅 과정에서 안정성이 높지 않으므로 플레이트 지지대와 함께 사용해야합니다.

하프 스커트 가장자리 플레이트 : 라벨 또는 바코드 적용 및 자동 적용에 적용 할 수 있으며 피펫 팅 안정성이 우수합니다.

풀 스커트 에지 플레이트 : 자동화 된 실험 애플리케이션에 매우 적합하며 바코드 라벨 및 애플리케이션에도 적용 할 수 있습니다. 기계적 강도가 우수하고 벌지 모듈 PCR 기기에 사용할 수 있으며 피펫 팅 과정에서 높은 안정성을 가지고 있습니다.

 

Q5 :PCR 플레이트의 경우 모서리와 라벨이 동일하지 않은 이유는 무엇입니까?

Huida : 모서리 절단과 마킹의 효과에 따라 다릅니다.

코너 절단 : PCR 플레이트의 코너 절단 위치 선택은 쉬운 배치를위한 적합한 기기의 요구 사항에 따라 다릅니다.

식별 : PCR 플레이트의 영숫자 마커는 개별 웰과 샘플 위치를 식별하는 데 도움이됩니다. 일반적으로 엠보싱 컬러 디지털 로고 또는 새겨진 로고의 경우. 일부 자동화 응용 분야의 경우 인쇄되고 표시된 반응 플레이트가 더 잘 밀봉됩니다.

 

Q6 : 일부 PCR 플레이트가 볼록하고 다른 플레이트가 평평한 이유는 무엇입니까? 어떤게 더 좋아?

Huida : 맞는 것이 가장 좋습니다. 일반적인 PCR 플레이트에는 평평한 기공 마진과 높은 기공 마진의 두 가지 종류가 있습니다.

대부분의 PCR 장치에 적합한 플랫 홀 마진 반응 플레이트.

상승 오리피스 가장자리가있는 반응 판은 멤브레인 밀봉을 용이하게하고 샘플 간의 교차 오염 위험을 줄입니다.

 

Huida는 PCR 제품 및 업계 높은 표준의 생산 및 처리에 다년간의 경험을 가지고 있습니다. 제품 라인은 풍부하며 대부분의 PCR 실험 응용 분야를 충족 할 수 있습니다. 실험용으로 적합한 제품을 선택하십시오.

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게시 시간 : Jun-03-2021